Talaan ng mga Nilalaman:

Paano ka pumili ng mga clone?
Paano ka pumili ng mga clone?

Video: Paano ka pumili ng mga clone?

Video: Paano ka pumili ng mga clone?
Video: HOW TO CHOOSE FLOWERHORN FRY BASIC TIPS || PAANO PUMILI NG FLOWERHORN FRY || ALLAN SOLETA 2024, Nobyembre
Anonim

Kailan pagpili a clone , siguraduhin na ang mga ugat ay malakas, puti at sabik na nakausli mula sa grow medium. Kung ang mga ugat ay kayumanggi at matuyo, o kung hindi man ay mukhang hindi aktibo, ibalik ito at maghanap ng mas mahusay.

At saka, paano mo i-clone ang isang solong cell?

  1. Bilangin ang mga cell upang mailagay ang ~16, 000 mga cell sa unang balon (A1) ng isang 96-well plate na naglalaman ng 200 µL ng medium.
  2. Alisin ang 100 µL mula sa A1 na naglalaman ng mga cell at ihalo sa B1, mag-pipet up at pababa ng 3x upang ihalo nang mabuti bago alisin ang 100 µL at paghaluin sa C1, atbp.

Gayundin, paano ka pipili ng kolonya ng mammalian cell? Ilagay ang plato sa ilalim ng mikroskopyo upang piliin ang hindi naiibang malusog mga kolonya . Pumili ng mga kolonya gamit ang P-20 pipette na nakatakda sa 10ul. Maingat Pumili a kolonya nang hindi naghihiwalay ang kolonya sa single mga selula , at ilipat ito sa isang 96-well plate na may trypsin. Mag-pipette ng pataas at pababa ng ilang beses upang ikalat ang kolonya.

Kaugnay nito, paano mo ginagamit ang isang clone cylinder?

Gamit sterile medium forceps, kunin ang isang pag-clone ng silindro . Dahan-dahang pindutin ang patag na ibaba ng silindro sa makinis na silicone grease at alisin nang may biglaang vertical na paggalaw. Kung gagawin nang maayos, magbibigay ito ng pantay na pamamahagi ng grasa sa ilalim ng silindro . Itakda ang silindro sa isang kolonya.

Paano ka pumili ng mga kolonya para sa matatag na mga linya ng cell?

Ang protocol para sa pagbuo ng mga matatag na linya ng cell ay nangangailangan ng ilang hakbang tulad ng ipinapakita sa ibaba:

  1. Bumuo ng kill curve upang matukoy ang pinakamainam na pagpili ng konsentrasyon ng antibiotic.
  2. Ilipat ang mga cell na may gustong (mga) plasmid construct
  3. Pumili at palawakin ang mga matatag na polyclonal colonies.
  4. Kilalanin ang mga solong clone sa pamamagitan ng limitadong pagbabanto at pagpapalawak.

Inirerekumendang: