Maaari mo bang i-sequence ang produkto ng PCR?
Maaari mo bang i-sequence ang produkto ng PCR?

Video: Maaari mo bang i-sequence ang produkto ng PCR?

Video: Maaari mo bang i-sequence ang produkto ng PCR?
Video: ๐Ÿ›ฉ Belarus โ†’ Georgia. 3โƒฃ Three months in Georgia, how sensations. โ„ Winter, ๐ŸŽ„ holidays ๐Ÿ—ฏ in Georgia. 2024, Nobyembre
Anonim

Direkta Pagsusunod-sunod ng Mga Produkto ng PCR . Ito ay lubos na posible na direkta pagkakasunod-sunod a produkto ng PCR nang hindi muna i-clone ang fragment. Direkta PCR sequencing ay bihirang matagumpay maliban kung ikaw gumugol ng ilang oras upang matiyak iyon ikaw ay hindi nahuhulog sa isa sa maraming bitag.

Sa ganitong paraan, ano ang sequencing PCR?

Direkta Pagsusunod-sunod ng PCR Mga produkto. Dapat mong alisin ang lahat PCR primer at unincorporated nucleotides bago ang produkto pinagsunod-sunod . Pagsusunod-sunod gumagamit lamang ng isang panimulang aklat sa halip na ang dalawang ginamit sa PCR . Kung hindi mo aalisin ang parehong mga panimulang aklat, makakakuha ka ng dalawa mga pagkakasunod-sunod nakapatong sa isa't isa na hindi nababasa.

Gayundin, maaari ba akong gumamit ng mga PCR primer para sa pagkakasunud-sunod? Mga panimulang aklat sa PCR ay inilaan para sa PCR amplification para makakuha ng amplicon. Mga panimulang aklat sa pagkakasunud-sunod ay ginamit sa pagkakasunod-sunod isang fragment ng DNA at ihayag ang DNA nito pagkakasunod-sunod kilalanin. 4. Dalawa Mga panimulang aklat sa PCR ay kailangan sa a PCR reaksyon (karaniwan); isa lang sequencing primer ay idinaragdag sa a pagkakasunud-sunod reaksyon.

Sa pagpapanatiling nakikita ito, paano mo susuriin ang mga produkto ng PCR?

Pagtuklas at pagsusuri ng Mga produkto ng PCR . Ang produkto ng a PCR dapat ay isang fragment o mga fragment ng DNA ng tinukoy na haba. Maraming mga diskarte ang maaaring magamit upang makita ang mga amplified sequence (tingnan ang Talahanayan). Ang pinakasimpleng at karaniwang ginagamit na pamamaraan ay electrophoresis ng produkto ng PCR sa isang agarose gel na may EtBr (ethidium bromide).

Bakit kailangang linisin ang mga produkto ng PCR bago i-sequence?

Paglilinis ng DNA mula sa a PCR ang reaksyon ay karaniwang kinakailangan para sa downstream na paggamit, at pinapadali ang pag-alis ng mga enzyme, nucleotides, primer at buffer na bahagi.

Inirerekumendang: